铁死亡以铁依赖性脂质过氧化为特征，由于其肿瘤易感性而成为肝细胞癌（HCC）干预的一种途径。m6A修饰参与了几种类型的细胞死亡调控，然而m6A修饰相关调节因子在HCC细胞铁死亡中的作用和分子机制尚不清楚。近期，上海市东方医院高勇、李砚东团队在Journal of Hematology & Oncology (IF 29.5)上发表文章“METTL16-SENP3-LTF axis confers ferroptosis resistance and facilitates tumorigenesis in hepatocellular carcinoma”，发现METTL16与IGF2BP2协同以m6A依赖的方式调节SENP3 mRNA的稳定性，METTL16-SENP3-LTF调控轴抑制铁死亡并促进HCC的发展，靶向METTL16-SENP3-LTF调控轴是一种很有前途的HCC治疗策略。

1. METTL16缺失促进铁死亡减轻肝肿瘤发生

作者发现METTL16可能是HCC中铁死亡的关键负调节因子，为了进一步阐明METTL16在铁死亡和肝癌中的作用，作者构建异种移植肿瘤模型，发现METTL16下调抑制肿瘤生长，并增强RSL3对肝癌异种移植肿瘤的抑制作用。IHC染色显示，敲低METTL16进一步增强了RSL3诱导的4-HNE表达，表明铁死亡活性增强。作者还建立了肝脏特异性Mettl16敲除小鼠（Mettl16^CKO），探讨了METTL16缺失对HCC进展的影响。发现与Mettl16^CKO小鼠相比，对照小鼠肝脏尺寸增大，肝脏重量/体重比增大，肿瘤病灶数量和肿瘤直径增大。此外，Mettl16^CKO小鼠表现出较轻的肝损伤和增强的肝肿瘤嗜铁活性。作者还利用AAV8-TBG-Cre/Ctrl病毒在MYC/Trp53^-/-HCC模型中建立了肝脏特异性条件敲除小鼠（Mettl16^f/f，AAV8-Cre），并进行了评估，得出了相似的结果。这些研究结果表明，METTL16缺乏可以减轻肝脏肿瘤的发生并促进铁死亡，其对铁死亡的抑制作用部分阐明了METTL16的致癌功能。

2. METTL16/IGF2BP2以m6A依赖的方式促进SENP3 mRNA的稳定性

为了探索METTL16调控铁死亡和HCC的机制，作者在TCGA数据库中预测METTL16共表达基因，其中SENP3因其高相关系数和已知对ROS刺激的反应性而成为首选候选基因。SENP3-CDS和3'UTR荧光素酶报告基因检测结果显示，METTL16过表达组荧光素酶活性增加，而METTL16催化失活突变型过表达组荧光素酶活性没有增加。此外METTL16过表达后，SENP3 CDS/3'UTR组的荧光素酶活性增加，而突变型组（SENP3 CDS/3'UTR-MUT）的相对荧光素酶活性则没有增加，RIP-qPCR也证实了METTL16与SENP3转录本中m6A修饰区域的强结合。此外METTL16过表达增加了SENP3 mRNA的稳定性，而METTL16敲低降低了这种稳定性。这些表明METTL16介导的m6A修饰增强了SENP3 mRNA的稳定性。进一步研究发现SENP3通过调控LTF泛素化水平，阻断其蛋白酶体依赖性降解。

3. METTL16/SENP3通过调节LTF的铁螯合功能抑制铁死亡

LTF作为铁螯合剂具有神经保护潜力，作者使用柠檬酸铁铵（FAC）和去铁胺（DFO）控制Fe³⁺浓度来诱导或抑制铁死亡，评估其在HCC中的作用，发现LTF过表达降低了FAC诱导的PLC/PRF/5细胞内LIP和Fe²⁺的积累，并伴有脂质过氧化和ROS水平的降低。DFO逆转了FAC的作用，表明LTF可能作为一种降铁抑制因子，可能通过铁螯合作用降低LIP。LTF还逆转了FAC诱导的GSH消耗和SENP3敲低导致的HCC细胞生长抑制，表明METTL16/SENP3具有抗铁凋亡作用。作者还利用MYC/Trp53^-/-HCC模型研究METTL16-SENP3-LTF调控轴在体内的作用，发现肝脏中Mettl16过表达导致更严重的肿瘤，通过敲除或耗尽Mettl16可以减轻这种影响。与Mettl16OE组相比，Mettl16OE+sgSENP3/sgLTF组中肝脏MDA水平升高，IHC染色显示4-HNE阳性细胞比例增加，这些结果支持METTL16/SENP3通过LTF减弱铁死亡活性促进肝癌发生。

本研究发现HCC组织中METTL16和SENP3表达升高与不良预后相关，METTL16通过m6A修饰增加SENP3表达，进而稳定LTF蛋白。这些发现说明了METTL16-SENP3-LTF轴在影响铁死亡和HCC进展中的作用，强调了靶向该轴破坏铁稳态和铁死亡易感性的治疗潜力。