细胞周期检测常见问题分析-分析方法-资讯-生物在线

细胞周期检测常见问题分析

作者:上海 BestBio 贝博生物 2015-05-06T00:00 (访问量:5094)

 Q:在测定细胞周期的时候,由于固定、消化等处理后会出现很多细胞碎片,影响测量结果,无法找到G1期细胞群。另外,在测定亚二倍体时,不是那么很清楚的显示出来。

 

A:方法改进:

在测定细胞周期的时候(以BD公司的Calibur为例),除了设置好获取数据的模版外,另外设置以FL3为横坐标的直方图,测量模式为对数(log),调整放大倍数,使二倍体峰出现在横坐标10*3的位置,就很容易的找到了二倍体峰和细胞周期个时相细胞的分布情况。根据它再调节FL2(线性模式下)的放大 倍数,使二倍体峰在10*2的位置即可。

 

Q:我要做流式分析细胞周期,我大概收集了106次方细胞,但细胞在乙醇固定之后,还看到有细胞沉淀的,但PBS洗涤两次之后,就基本没什么细胞沉淀了,上机发现就发现不了细胞了。这是怎么回事啊?怎么解决这个问题啊?

 

A:很可能是洗细胞的过程中丢失了,解决办法有: 

1)尽量采用尖底的离心管和水平离心机 

2)离心后尽量用吸管吸取上清,不要倾倒;吸上清时最好残留1mm左右的水膜,不要吸完。 

3)离心的转速或时间可稍微增加一点儿 

4)每次加试剂时,吸头最好不要接触液面;混匀时最好不要用吸头吹打,以免吸头挂壁带走部分细胞。

 

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