猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒-分子生物实验仪器-仪器设备-生物在线
上海雅吉生物科技有限公司
猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒

猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒

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产品名称: 猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒

英文名称: Elisa Kit

产品编号: YS07309B

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产品产地: 中国

品牌商标: 雅吉生物

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上海雅吉生物科技有限公司
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产品名称:猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒
产品存储:2-8℃
有 效 期:6个月
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入样本,再与HRP标记的)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中指标浓度。 
猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒组成:
1,30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶         7,终止液               6ml×1瓶
2,酶标试剂      6ml×1瓶         8,标准品               0.5ml×1瓶
3,酶标包被板     12孔×8条         9,标准品稀释液     1.5ml×1瓶
4,样品稀释液      6ml×1瓶        10,说明书              1份
5,显色剂A液      6ml×1瓶        11,封板膜              2张  
6,显色剂B液      6ml×1/瓶        12,密封袋              1个
标本要求 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
5号标准品:150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
4号标准品:150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
3号标准品:150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2?标准品:150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1号标准品:150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
猪巨细胞病毒抗原(PCMV-Ag)试剂盒计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。  
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